［关键字］ 耐甲氧西林葡萄球菌；纸片扩散法；仪器法；琼脂稀释法
耐甲氧西林葡萄球菌所致院内感染已成为全球范围内一个愈加紧急的问题［1］，有效预防和控制其感染的重点是准时准确地检出MRS，为临床合理选择抗生素提供依据［2］，因而快捷、准确的测试办法对迅速采取有效的感染控制手段和MRS感染时尚病学调查十分要紧。MRS的测试办法有苯唑西林纸片扩散法、肉汤稀释法、琼脂扩散法、E?test法、仪器法及PCR技术测试mecA基因等［3］，大家将临床离别的63株葡萄球菌用含4%氯化钠 M?H平板苯唑西林纸片扩散法和VITEK?32型自动微生物鉴别仪法进行测试比较，并以含6μg/ml苯唑西林的琼脂稀释法为标准，评价其准确性。
1 材料与办法
1.1材料
1.1.1菌株及其来源自2006年1月至2006年5月从江医二附院临床病人的痰、血、尿、脓液、前列腺液及阴道分泌物等标本，常常规离别得到63 株葡萄球菌，包含凝固酶阳性葡萄球菌50 株，凝固酶阴性葡萄球菌13株。另MRS阳性参考菌株ATCC43300，MRS阴性金黄色葡萄球菌ATCC25923，购自卫生部临检中心。
1.1.2苯唑西林纸片购自北京天坛生物制品公司，苯唑西林标准品购自重庆药友制药公司，SDS琼脂糖、溴化乙锭、溶菌酶、蛋白酶K为美国Sigma商品，丙烯酰胺、双丙烯酰胺TEMED和TBE为美国Gibcobrl公司商品。
1.1.3仪器法国生物梅里埃公司生产的VITEK?32型鉴别系统及配套的GPS?SV葡萄球菌药敏测试卡。
1.2办法
1.2.1含4% NaCl M?H平板纸片扩散法因为苯唑西林较甲氧西林稳定、不容易失活，一般用苯唑西林代替甲氧西林测定葡萄球菌。配制0.5麦氏单位菌液接种于含4% NaCl的M?H平板，贴1 μg/片苯唑西林药敏纸片，35 ℃、24 h察看结果金黄色葡萄球菌抑菌圈≥13 mm为敏锐，11 mm～12 mm为中介，≤10 mm为耐药，凝固酶阴性葡萄球菌≥18 mm为敏锐，≤17 mm为耐药。
1.2.2琼脂稀释法NCCLS推荐为测定耐甲氧西林葡萄球菌的参考办法，在含4% NaCl、6 μg/ml苯唑西林M?H平板中点种0.5麦氏单位菌液，经35 ℃、24 h孵育检查琼脂表面有无细菌成长，只须有一个菌落成长即判为MRS。
1.2.3仪器测试挑取待检菌落，严格参照GPS?SV卡说明书配制肯定浓度菌悬液，置备GPS?SV药敏卡上机，用VITEK?32型全自动微生物鉴别仪测试结果。
1.2.4水平控制以金黄色葡萄球菌ATCC43300为MRS阳性参考菌株，金黄色葡萄球菌ATCC25923为MRS阴性参考菌株及药敏质控菌株与实验菌株同时进行测试。
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